一、产品简介:
台盼蓝(Trypan Blue)是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性与细胞的存活率,是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。正常的活细胞细胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,因此不会被染成蓝色;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞可被台盼蓝染成蓝色。通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡。台盼蓝可被巨噬细胞吞噬,故可用于巨噬细
胞的活体染色剂,凋亡小体也有台盼蓝拒染现象,因此台盼蓝溶液不能区分凋亡细胞和死亡细胞。台盼蓝染色后,显微镜下直接计数或拍照后计数,就可以对细胞存活率进行较精确的定量。染色时间只需 3-5 分钟,操作简单。
二、产品使用方法:
1. 样本处理:收集待检测细胞悬液,离心(1000-1500rpm, 5min)后弃上清,用适量的 PBS 重悬细胞,调整细胞浓度至 1X105-1X106 个/ml。
2. 台盼蓝染色:细胞悬液与 0.4%台盼蓝染色液以 9:1 比例混匀,使得台盼蓝染色液终浓度为 0.04%,轻轻混匀,室温染色 3
分钟(染色时间可以更长一些,但不宜超过 10 分钟,避免细胞损伤)。
3. 检测:吸取少量染色后的细胞悬液滴加至血细胞计数板,在显微镜下可以观察到,死细胞着蓝色并膨大,无光泽;活细胞
则不着色并保持正常形态,有光泽。
4. 按公式计算存活率:细胞存活率(%)= 活细胞总数/(活细胞总数+死细胞总数)×100%
三、注意事项:
1、染色时间不能太长,否则活细胞会因染料积累而染成颜色,使检测结果出现偏差;
2、本产品长时间存放可能会出现少量颗粒状沉淀,可在 37℃水浴约 10 分钟以充分溶解沉淀,沉淀完全溶解后即可正常使用;
3、细胞计数时,若要比较精确地进行定量,建议每个细胞样品不少于 500 个细胞;
4、台盼蓝有潜在的致癌风险,操作时请穿实验服并戴一次性手套,以避免直接接触人体或吸入体内;
5、本产品仅用于科研或进一步研究使用,不用于诊断和治疗。
四、保存条件:
产品置于 2~8℃避光保存,请勿冻结;产品保质期为 12 个月,请于保质期内使用